01 视频资源

https://v.qq.com/x/page/r3006vwoapj.html

NMT在斑马鱼离子细胞的应用：从生理到环境毒理-林豊益

 

https://v.qq.com/x/page/z08314x9psg.html

显微镜下观察斑马鱼心脏跳动

 

https://v.qq.com/x/page/q0831zxplx8.html

显微镜下观察斑马鱼皮肤离子细胞

 

 

 

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02 参考文献

 

1）Doughty JM, Langton PD. Measurement of chloride flux associated with the myogenic response in rat cerebral arteries. J Physiol. 2001;534(Pt 3):753-761.  doi:10.1111/j.1469-7793.2001.t01-1-00753.x

 

2）Hung GY, Wu CL, Chou YL, Chien CT, Horng JL, Lin LY. Cisplatin exposure impairs ionocytes and hair cells in the skin of zebrafish embryos. Aquat Toxicol. 2019;209:168-177. doi:10.1016/j.aquatox.2019.02.006

 

 

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03 常测那些指标

 

NH₄⁺、H⁺、Ca²⁺、K⁺、Na⁺、Cl^-

 

 

04 检测这些离子流、分子流，有什么生物学意义

 

1）H⁺生理功能概述

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2）科研案例

利用斑马鱼皮肤离子细胞作为模式细胞，评价化疗药物顺铂的肾毒性。幼体斑马鱼的皮肤离子细胞起到调节体内酸碱平衡、渗透平衡等重要作用，正常情况下可测到皮肤H⁺的外排（排酸），顺铂处理后，皮肤H⁺外排速率下降，且下降幅度与顺铂的处理剂量成正比。通过荧光染色发现，此时皮肤离子细胞的数量明显减少。这预示着可以通过检测皮肤H⁺外排的速率，来筛选用于缓解化疗药物肾毒性的药物。

 

 

 

 

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05 可以检测哪些样品

 

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1、动物样品

1）细胞

神经细胞、肿瘤细胞、巨噬细胞、淋巴细胞等

2）组织器官

肿瘤、皮肤、胃粘膜、胰岛、脑（海马体等）、胚胎（大鼠、鱼）、斑马鱼皮肤/鳃、耳蜗、心脏（香螺）、卵（鱼、鸡蛋、爪蟾）、骨骼、角膜、脊椎（豚鼠）、肌肉组织（肌纤维、心肌）

3）其它动物样品

珊瑚、螨虫、昆虫（果蝇幼虫的肠、蟑螂血脑屏障、按蚊、长红锥蝽）、蝌蚪、水蛭、蓝蟹（微感毛）、变形虫、水丝蚓

 

2、植物样品

1）营养器官

根：根、根毛、根瘤*
茎：边材、心材、微管形成层、木质部
叶：表皮细胞、叶肉细胞、盐腺细胞、保卫细胞

2）生殖器官

花：花瓣、花瓣表皮细胞、花粉
种子：整体、胚
果实：果壳、果皮、果肉（苹果、柑橘）、籽粒、棉花纤维、棉桃

3）细胞：植物悬浮细胞、液泡

4）愈伤组织

 

3、微生物样品

酵母细胞、菌丝、菌落、微藻、细菌（大肠杆菌）

 

4、其它生物样品

周丛生物

 

5、非生物样品

金属、混凝土、泥沙、纳米材料、生物医药材料

 

 

06 样品需要做哪些前处理

 

国际领先的非损伤微测技术最大的特点就是活体、无损检测，因此动植物材料在检测前，不需要任何的液氮速冻、染色、研磨处理等。

 

1、动物单细胞

因NMT是活体检测，故从培养箱中拿出来后，置于培养皿中，直接检测即可。

 

2、动物组织

因NMT是活体检测，无需提前处理。如检测部位天然暴露在外，如斑马鱼皮肤离子细胞、侧线毛细胞，直接检测即可。如检测部位位于体内，需在检测时暴露出检测部位（可采用麻醉的方式），后检测即可。

 

3、植物根茎叶等组织器官

天然暴露在外的组织器官，例如根、茎、叶的表面，无需任何处理，直接检测即可。水培、土培、砂培、平板培养均可。

 

4、植物原生质体/液泡

因NMT是基于微传感器/探针的非损伤检测，检测时不接触样品，故原生质体、液泡需要从组织或者细胞中，提取出来后检测。

 

5、植物叶片的表皮细胞、叶肉细胞、盐腺细胞、保卫细胞

无需提前处理。因这些细胞处于组织内部，故检测时采用撕取等方式，暴露出相应细胞即可。

 

6、植物花粉管

离体萌发：在培养皿中萌发一段时间后即可直接检测；在体萌发：将柱头置于培养皿中，待萌发一段时间后即可直接检测。

 

7、植物果实

无需提前处理。如待测部位位于果实内部，需在检测前暴露出相应部门即可。

 

8、植物悬浮细胞

无需提前处理。检测时，置于培养皿中检测即可。

 

 

07 有哪些检测方式?

 

1、实时处理 /瞬时处理后检测

 

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即瞬时处理，是指在检测过程中，在正常测试液中瞬间加入所需的干旱胁迫溶液（PEG或甘露醇等溶液）的处理方法，目的是为了观察瞬间干旱胁迫下，样品短时间内的离子/分子的变化趋势，即短时效应。

 

2、预处理/提前处理好后检测

是指在干旱胁迫一段较长的时间后（数十分钟/数小时/数天），观察植物离子/分子进出的情况，即长时效应。

 

 

08 检测环境是空气还是溶液

 

检测时，只要求待测部位浸于溶液中（无需整体都浸在溶液里）。

 

 

09 样品是如何检测的

 

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10 可以送样检测吗

 

可以送样检测。目前非损伤微测技术测试服务由中关村NMT产业联盟统筹管理，由遍布全国的25家NMT创新平台服务中心，提供检测服务。

 

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