台大：抗利尿激素调节离子和酸碱平衡的机制 | NMT斑马鱼创新科研平台

转自中关村旭月非损伤微测技术产业联盟

NMT作为生命科学关键核心技术，是建立活体创新科研平台的必备技术。2005年~2020年，NMT已扎根中国15年。2020年，中国NMT销往瑞士苏黎世大学，正式打开欧洲市场。

20200902 4

林豊益《NMT在斑马鱼离子细胞的应用：从生理到环境毒理》
点击查看视频

基本信息
主题：抗利尿激素调节离子和酸碱平衡的机制
期刊：International Journal of Molecular Sciences
研究使用平台：NMT斑马鱼创新科研平台
标题：Arginine Vasopressin Modulates Ion and Acid/Base Balance by Regulating Cell Numbers of Sodium Chloride Cotransporter and H⁺-ATPase Rich Ionocytes
作者：台湾大学周铭翊、中研院细胞与个体生物学研究所黃鹏鹏

检测离子/分子指标

H⁺

检测样品

斑马鱼胚胎皮肤离子细胞

中文摘要（谷歌机翻）
精氨酸加压素（Avp）是一种保守的多效激素，已知可以调节水的重吸收和离子平衡。然而，影响其作用的许多机制仍不清楚。在这里，我们使用斑马鱼胚胎来研究Avp如何调节离子和酸碱稳态。将胚胎在双蒸水中孵育24小时后，avp mRNA表达水平显着上调。通过反义寡核苷酸吗啉代（MO）敲低AVP蛋白表达的减少的ionocyte相关基因的表达和下调全身氯-含量和H⁺的分泌，而Na⁺和Ca²⁺水平不受影响。AVP拮抗剂SR49059孵育还下调氯化钠协同转运蛋白2B（的mRNA表达ncc2b），这是负责氯转运-摄取。相应地，avp morphant显示较低的NCC和H⁺-ATPase富集（HR）细胞数目，但Na⁺/K⁺-ATPase富集（NaR）细胞数目保持不变。avp MO还下调了foxi3a和p63表达细胞的数量。最后，降钙素基因相关肽（cgrp）及其受体降钙素受体样1（1crlr1），在被下调AVP morphants，这表明AVP可能影响CGRP和Crlr1调制氯-平衡。总之，我们的结果揭示了Avp调节离子和酸碱平衡的分子/细胞途径，从而提供了对其功能的新见解。

离子/分子流实验处理方法
斑马鱼胚胎在1-2细胞期
· 对照组
· 精氨酸加压素（Avp）敲低组

离子/分子流结果
Avp敲低组斑马鱼胚胎离子细胞，H⁺分泌较对照组弱。

20200902 5

NMT非损伤微测技术检测斑马鱼皮肤离子细胞

点击查看视频链接

其它实验结果
Avp及其受体在斑马鱼组织中广泛表达。
avp敲低下调Avp蛋白表达。
Avp调节离子细胞的功能。
Avp调节斑马鱼胚胎皮肤上的离子细胞数量。
Avp敲低组显示Cgrp及其受体Crlr1的表达减少。

结论
斑马鱼胚胎在双蒸水中孵育24h后，avp mRNA表达水平显著上调。通过反义吗啉寡核苷酸（MO）敲低Avp蛋白表达，降低了离子细胞相关基因的表达，降低了全身Cl^-含量和H⁺分泌，而Na⁺和Ca²⁺水平不受影响。Avp拮抗剂SR49059的孵育也下调了氯化钠共转运蛋白2b（ncc2b）的mRNA表达，该转运蛋白是一种负责Cl^-吸收的转运蛋白。相应地，avp敲低组的NCC和富含H⁺-ATPase（HR）细胞数较低，但富含Na⁺/K⁺-ATPase（NaR）细胞数保持不变。Avp敲低组中foxi3a和p63表达细胞的数量也有下调。最后，cgrp及其受体crlr1的mRNA表达水平在Avp敲低组中下调，表明Avp可能影响Cgrp和Crlr1调节Cl^-平衡。