台医大 Carbohyd Polym：NMT揭示以斑马鱼为材料的壳聚糖毒理机制 |NMT毒理创新科研平台

基本信息

主题：NMT揭示以斑马鱼为材料的壳聚糖毒理机制

期刊：Carbohydrate Polymers

研究使用平台：NMT毒理创新科研平台

标题：Characterizationand toxicology evaluation of low molecular weight chitosan on zebrafish

作者：台北医学大学 Chia-Hsiung Cheng、Chih-Ming Chou

检测指标

Na⁺

检测样品

斑马鱼幼鱼上皮细胞

离子流实验处理方法

斑马鱼幼体被浸泡在10μg/mL低分子壳聚糖（LMWCS）和10μg/mL LMWCS+ 10 mM Na₂HPO₄中5分钟后检测。

Na⁺流结果

        采用非损伤微测技术对斑马鱼幼体上皮细胞释放的Na⁺进行实时检测。用10μg/mL的LMWCS孵育后，3只斑马鱼幼体的上皮细胞迅速释放出Na⁺。用10 mM Na₂HPO₄中和可显著逆转Na⁺的流出。总的来说，这些数据表明LMWCS破坏了斑马鱼幼体的上皮细胞膜功能。

其它实验结果

• LMWCS对斑马鱼幼鱼具有一定的毒性，PBS和Na₂HPO₄缓冲液均能有效地中和这种毒性

• LMWCS导致斑马鱼幼鱼的上皮细胞严重受损，最终导致其死亡

• 在斑马鱼幼鱼死亡前，可能引起卵黄上皮损伤和行为异常

• LMWCS对斑马鱼肝脏细胞膜损伤具有细胞毒性

• LMWCS破坏了成年斑马鱼的组织，鳃瓣损伤是成年斑马鱼死亡的主要原因

• LMWCS在河水中也可导致斑马鱼死亡

结论

        LMWCS可迅速导致斑马鱼幼鱼和成鱼在水中死亡，即使在正常的河水中也是如此。LMWCS靶向并破坏上皮细胞膜和鳃瓣，诱导斑马鱼幼鱼和成鱼死亡。此外，LMWCS对斑马鱼肝细胞、斑马鱼幼鱼和成鱼的毒性可以用Na₂HPO₄缓冲液中和。即使在斑马鱼模型中也发现了LMWCS的毒性，但由于LMWCS的水不溶性和易被其它负离子中和，其毒性只存在于pH<7的环境中这些结果提供了对LMWCS特性的新理解。

离子流实验使用的测试液

0.5 NaCl,0.2 CaSO₄,0.2 MgSO₄,0.16 KH₂PO₄,0.16 K₂HPO₄，pH 7.0（单位mM）