肿瘤研究NMT标准化方案
肿瘤研究NMT标准化方案
一、视频资源
二、参考文献
三、常测哪些指标
Ca2+、H+、O2、Cl-、K+
四、检测这些离子流、分子流,有什么生物学意义
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1)H+生理功能概述
2)科研案例
使用非损伤微测技术建立了药物抗性研究方法(drug resistance study method,DRSM),该方法可用于研究器官、组织、细胞外离子、分子活性与肿瘤细胞耐药性之间的相互关系。结果表明存在一个持续的并以固有振荡形式出现的胞外H+流现象。耐药株H+流在加ADR(阿霉素)前趋近于零,而敏感株H+呈明显内流。敏感株和耐药株加ADR后H+均呈外流,但耐药株的H+外流为敏感株5倍。与H+流速结果相一致的是胞外的pH也产生了相应的改变。本研究为胞外H+活性与肿瘤耐药性的相互关联提供了直接证据。
宋瑾,唐勇,许越.用非损伤微测技术研究肿瘤细胞的耐药性与其胞外H+流变化的相关性.生物物理学报,2008(03):191-197.
五、可以检测哪些样品
1、动物样品
1)细胞
神经细胞、肿瘤细胞、巨噬细胞、淋巴细胞等
2)组织器官
肿瘤、皮肤、胃粘膜、胰岛、脑(海马体等)、胚胎(大鼠、鱼)、斑马鱼皮肤/鳃、耳蜗、心脏(香螺)、卵(鱼、鸡蛋、爪蟾)、骨骼、角膜、脊椎(豚鼠)、肌肉组织(肌纤维、心肌)
3)其它动物样品
珊瑚、螨虫、昆虫(果蝇幼虫的肠、蟑螂血脑屏障、按蚊、长红锥蝽)、蝌蚪、水蛭、蓝蟹(微感毛)、变形虫、水丝蚓
2、植物样品
1)营养器官
茎:边材、心材、微管形成层、木质部
2)生殖器官
花:花瓣、花瓣表皮细胞、花粉
种子:整体、胚
果实:果壳、果皮、果肉(苹果、柑橘)、籽粒、棉花纤维、棉桃
3)细胞:植物悬浮细胞、液泡
4)愈伤组织
3、微生物样品
酵母细胞、菌丝、菌落、微藻、细菌(大肠杆菌)
4、其它生物样品
周丛生物
5、非生物样品
金属、混凝土、泥沙、纳米材料、生物医药材料
六、样品需要做哪些前处理
国际领先的非损伤微测技术最大的特点就是活体、无损检测,因此动植物材料在检测前,不需要任何的液氮速冻、染色、研磨处理等。
1、动物单细胞
因NMT是活体检测,故从培养箱中拿出来后,置于培养皿中,直接检测即可。
2、动物组织
因NMT是活体检测,无需提前处理。如检测部位天然暴露在外,如斑马鱼皮肤离子细胞、侧线毛细胞,直接检测即可。如检测部位位于体内,需在检测时暴露出检测部位(可采用麻醉的方式),后检测即可。
3、植物根茎叶等组织器官
天然暴露在外的组织器官,例如根、茎、叶的表面,无需任何处理,直接检测即可。水培、土培、砂培、平板培养均可。
4、植物原生质体/液泡
因NMT是基于微传感器/探针的非损伤检测,检测时不接触样品,故原生质体、液泡需要从组织或者细胞中,提取出来后检测。
5、植物叶片的表皮细胞、叶肉细胞、盐腺细胞、保卫细胞
无需提前处理。因这些细胞处于组织内部,故检测时采用撕取等方式,暴露出相应细胞即可。
6、植物花粉管
离体萌发:在培养皿中萌发一段时间后即可直接检测;在体萌发:将柱头置于培养皿中,待萌发一段时间后即可直接检测。
7、植物果实
无需提前处理。如待测部位位于果实内部,需在检测前暴露出相应部位即可。
8、植物悬浮细胞
无需提前处理。检测时,置于培养皿中检测即可。
七、有哪些检测方式?
即瞬时处理,是指在检测过程中,在正常测试液中瞬间加入所需的干旱胁迫溶液(PEG或甘露醇等溶液)的处理方法,目的是为了观察瞬间干旱胁迫下,样品短时间内的离子/分子的变化趋势,即短时效应。
2、预处理/提前处理好后检测
是指在干旱胁迫一段较长的时间后(数十分钟/数小时/数天),观察植物离子/分子进出的情况,即长时效应。
八、检测环境是空气还是溶液
检测时,只要求待测部位浸于溶液中(无需整体都浸在溶液里)。
九、样品是如何检测的
十、可以送样检测吗
可以送样检测。目前非损伤微测技术测试服务由中关村NMT产业联盟统筹管理,由遍布全国的25家NMT创新平台服务中心,提供检测服务。点击获取测试服务