植物叶片(如:保卫细胞等

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(一)镊子撕取法(适用于叶片较大的植物,例如烟草)

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准备工具:培养皿、镊子、双面胶、剪刀、毛笔(或小刷子)等。
具体步骤:
1. 剪一小块双面胶粘在干燥的塑料培养皿底待用,面积不宜太大。
2. 用镊子撕取表皮条(下表皮)。撕取下的表皮条需要一部分透明,另一部分留有绿色叶片用于粘连固定样品。
一般情况下,只要肉眼能看见透明的表皮条,其上就会存在待测的保卫细胞,不宜太大,太大容易卷曲。
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3. 将带有透明表皮条的叶片部分粘在双面胶上,透明表皮部分露在双面胶之外。为了使得表皮条跟皿之间能够紧贴,可在远离双面胶的地方滴一小滴测试液,粘之前让表皮吸附一些液体(绿色叶片部分尽量不要粘液体),靠张力将表皮条吸在皿底。
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4. 用湿毛笔轻轻刷去表皮条表面的叶肉细胞。
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5. 加入测试液平衡一段时间(一般为10~15min)后倒掉,由于撕取表皮的过程中会造成叶片细胞的破裂,在平衡过程中可以多更换几次测试液,以保证平衡效果。平衡结束后需要更换新鲜测试液即可测试。如果加入测试液后表皮条漂起,再用毛笔轻轻刷一下并更换新鲜的测试液。


(二)胶带粘贴撕取法(适用于叶片较小的植物,例如拟南芥)

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准备工具:培养皿、深色绝缘胶带、白色透明胶带(Magic Tape)、剪刀等。
具体步骤:
1.剪取叶片将叶片上表面粘贴在深色绝缘胶带上,并使用剪刀适当修剪叶片边缘。
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2.将白色透明胶带边缘剪取一个小的缺口,注意缺口的大小,过大过小都不利于获取叶片的保卫细胞。
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3. 使用白色透明胶带带有缺口的地方粘贴叶片的下表皮。
4. 将白色透明胶带撕下,利用两个胶带的粘贴力可以获取叶片下表皮的保卫细胞。
  5. 将撕取的样品粘贴固定到干净的培养皿中。
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  6. 加入测试液平衡一段时间(10~15min)后倒掉,由于撕取表皮的过程中会造成叶片细胞的破裂,在平衡过程中可以多更换几次测试液,以保证平衡效果。平衡结束后需要更换新鲜测试液即可测试。



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