植物病害研究NMT解决方案

植物病害研究NMT解决方案

 

一、视频资源

二、参考文献

三、常测哪些指标

Ca2+、K+、H+

四、检测这些离子流、分子流,有什么生物学意义

  • 1)Ca2+生理功能概述

    2)科研案例

    水稻 CDS1编码 OsCNGC9,对水稻瘟病抗性具有正向调控作用。利用NMT检测不同处理条件下水稻叶肉细胞 Ca2+吸收速率,发现在 PAMPs刺激下,野生型(WT)叶肉细胞表现出强烈且迅速的Ca2+ 吸收。这说明: OsCNGC9 会介导水稻PTI的Ca2+吸收,而这种能力在cds1突变体中减弱。结合其他研究结果,证明信号级联将模式识别与钙通道活性联系起来,这是启动水稻 PTI和抗病性的必要条件。(Wang J, Liu X, Zhang A, et al. A cyclic nucleotide-gated channel mediates cytoplasmic calcium elevation and disease resistance in rice. Cell Res. 2019;29(10):820-831. doi:10.1038/s41422-019-0219-7)

     

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  • 1)K+生理功能概述

    2)科研案例

    以水稻幼苗为研究对象,发现了稻瘟病菌M. oryzae通过K+通道破坏免疫的效应蛋白 AvrPiz-t。为研究稻瘟病抗性与外部K+变化的直接关系,课题组检测了野生型及 AvrPiz-t转基因型水稻活体根的分生区的K+流变化过程。结果显示:相对于野生型,转基因型水稻的K+吸收速率在外部K+浓度为0.1mM时明显降低;但在0.1mM时,无明显差异。且流速测定与K+含量测定的结果一致。这些数据表明:AvrPiz-t会部分抑制水稻中K+的吸收,病原体通过调节宿主的K+通道抑制宿主免疫反应,为病原介导的植物营养途径的扰动,其分子机制提供了新的认识。(Shi X, Long Y, He F, et al. The fungal pathogen Magnaporthe oryzae suppresses innate immunity by modulating a host potassium channel. PLoS Pathog. 2018;14(1):e1006878. Published 2018 Jan 31. doi:10.1371/journal.ppat.1006878)

     

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五、可以检测哪些样品

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1、动物样品

1)细胞

神经细胞、肿瘤细胞、巨噬细胞、淋巴细胞等

2)组织器官

肿瘤、皮肤、胃粘膜、胰岛、脑(海马体等)、胚胎(大鼠、鱼)、斑马鱼皮肤/、耳蜗、心脏(香螺)、卵(鱼、鸡蛋、爪蟾)、骨骼、角膜、脊椎(豚鼠)、肌肉组织(肌纤维、心肌)

3)其它动物样品

珊瑚、螨虫、昆虫(果蝇幼虫的肠、蟑螂血脑屏障、按蚊、长红锥蝽)、蝌蚪、水蛭、蓝蟹(微感毛)、变形虫、水丝蚓

 

2、植物样品

1)营养器官

根:根毛、根瘤*

茎:边材、心材、微管形成层、木质部

叶:表皮细胞、叶肉细胞、盐腺细胞、保卫细胞

2)生殖器官

花:花瓣、花瓣表皮细胞、花粉

种子:整体、胚

果实:果壳、果皮、果肉(苹果、柑橘)、籽粒、棉花纤维、棉桃

3)细胞:植物悬浮细胞、液泡

4)愈伤组织

 

3、微生物样品

酵母细胞、菌丝、菌落、微藻、细菌(大肠杆菌)

 

4、其它生物样品

周丛生物

 

5、非生物样品

金属、混凝土、泥沙、纳米材料、生物医药材料

 

六、样品需要做哪些前处理

非损伤微测技术最大的特点就是活体、无损检测,因此动植物材料在检测前,不需要任何的液氮速冻、染色、研磨处理等。

1、动物单细胞

因NMT是活体检测,故从培养箱中拿出来后,置于培养皿中,直接检测即可

2、动物组织

因NMT是活体检测,无需提前处理。如检测部位天然暴露在外,如斑马鱼皮肤离子细胞、侧线毛细胞,直接检测即可。如检测部位位于体内,需在检测时暴露出检测部位(可采用麻醉的方式),后检测即可。

3、植物根茎叶等组织器官

天然暴露在外的组织器官,例如根、茎、叶的表面,无需任何处理,直接检测即可。水培、土培、砂培、平板培养均可。

4、植物原生质体/液泡

因NMT是基于微传感器/探针的非损伤检测,检测时不接触样品,故原生质体、液泡需要从组织或者细胞中,提取出来后检测。

5、植物叶片的表皮细胞、叶肉细胞、盐腺细胞、保卫细胞

无需提前处理。因这些细胞处于组织内部,故检测时采用撕取等方式,暴露出相应细胞即可。

6、植物花粉管

离体萌发:在培养皿中萌发一段时间后即可直接检测;在体萌发:将柱头置于培养皿中,待萌发一段时间后即可直接检测。

7、植物果实

无需提前处理。如待测部位位于果实内部,需在检测前暴露出相应部门即可。

8、植物悬浮细胞

无需提前处理。检测时,置于培养皿中检测即可。

七、有哪些检测方式?

1、实时处理 /瞬时处理后检测

即瞬时处理,是指在检测过程中,在正常测试液中瞬间加入所需的干旱胁迫溶液(PEG或甘露醇等溶液)的处理方法,目的是为了观察瞬间干旱胁迫下,样品短时间内的离子/分子的变化趋势,即短时效应。

 

2、预处理/提前处理好后检测

是指在干旱胁迫一段较长的时间后(数十分钟/数小时/数天),观察植物离子/分子进出的情况,即长时效应。

 

八、检测环境是空气还是溶液

检测时,只要求待测部位浸于溶液中(无需整体都浸在溶液里)。

九、样品是如何检测的

十、可以送样检测吗

可以送样检测。目前非损伤微测技术测试服务由中关村NMT产业联盟统筹管理,由遍布全国的22家NMT创新平台服务中心,提供检测服务。点击获取测试服务

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十一、哪里能获取非损伤微测系统操作培训服务

请直接联系旭月公司获取设备操作培训服务。点击此处查看培训服务介绍

联系人:巨肖宇

电话:010-8262 2628转22

十二、如何购买实验耗材(自行检测)