IAA研究NMT解决方案

IAA研究NMT解决方案

 

一、视频资源

二、参考文献

三、常测哪些指标

H+、IAA

四、检测这些离子流、分子流,有什么生物学意义

  • 1)H+、IAA生理功能概述

    2)科研案例

    案例1

    为了探究JA影响根系生长的生理和分子机制,利用NMT技术研究了拟南芥Col-0、coi1-1突变体根尖区域生长素和质子流速的影响。Col-0植物根部IAA外排流速的峰值出现在根尖300 μm处,在伸长区和成熟区IAA内流。coi1-1的 IAA流速与Col-0幼苗相似。外源50 μm MeJA处理Col-0和coi1-1的幼苗根系时,过渡区IAA外排速率明显受到抑制,而在伸长区和成熟区IAA流速没有显著差异。相反,在coi1-1幼苗根上,MeJA处理对 IAA流速没有影响。为了探讨IAA流速是否与PM H+-ATPase有关,进一步监测了钒酸盐预处理Col-0根系的 IAA流速, 发现IAA外排沿着这些根增加,最显著的区域是分生区和过渡区。幼苗根系的跨膜H+流速与IAA相反,在分生区和过渡区H+内流。然而,在伸长区和成熟区,H+外排。钒酸盐处理增加了Col-0根分生区和过渡区的H+内流。coi1-1根的H+流速与Col-0相似。外源MeJA显著增加H+分泌,最显著的区域是过渡区。外源MeJA对coi1-1根系的净H+流速没有显著影响。结合基因表达水平等实验结果,表明JA信号可能通过调节关键基因的表达来调节生长素信号通路。

    Yan S et al. MeJA Affects Root Growth by Modulation of Transmembrane Auxin Flux in the Transition Zone. Journal of Plant Growth Regulation, 2016, 35(1):256-265.

     

    IAAyanjiu1

    案例2

    为了研究虫害后植物生长速率降低的潜在机制,使用小菜蛾取食拟南芥叶片,利用NMT技术研究小菜蛾取食拟南芥叶片后根尖IAA和H+流速。结果显示,在靠近根系表面过渡区的地方,净IAA流速在虫害后降低(Fig.3)。相反,昆虫取食引起了根表面H+净流速的增加,其中最显著的反应发生在过渡区(Fig.4)。结果结果表明,虫害后植物的的生长减少可能与生长素流速和质子分泌减少有关。

    Yan S et al. Insect Herbivory of Leaves Affects the Auxin Flux Along Root Apices in Arabidopsis thaliana. Journal of Plant Growth Regulation, 2017.)

    IAAyanjiu2

    IAAyanjiu3

五、可以检测哪些样品

点击查看具体信息

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1、动物样品

1)细胞

神经细胞、肿瘤细胞、巨噬细胞、淋巴细胞等

2)组织器官

肿瘤、皮肤、胃粘膜、胰岛、脑(海马体等)、胚胎(大鼠、鱼)、斑马鱼皮肤/、耳蜗、心脏(香螺)、卵(鱼、鸡蛋、爪蟾)、骨骼、角膜、脊椎(豚鼠)、肌肉组织(肌纤维、心肌)

3)其它动物样品

珊瑚、螨虫、昆虫(果蝇幼虫的肠、蟑螂血脑屏障、按蚊、长红锥蝽)、蝌蚪、水蛭、蓝蟹(微感毛)、变形虫、水丝蚓

2、植物样品

1)营养器官

根:根毛、根瘤*

茎:边材、心材、微管形成层、木质部

叶:表皮细胞、叶肉细胞、盐腺细胞、保卫细胞

2)生殖器官

花:花瓣、花瓣表皮细胞、花粉

种子:整体、胚

果实:果壳、果皮、果肉(苹果、柑橘)、籽粒、棉花纤维、棉桃

3)细胞:植物悬浮细胞、液泡

4)愈伤组织

3、微生物样品

酵母细胞、菌丝、菌落、微藻、细菌(大肠杆菌)

4、其它生物样品

周丛生物

5、非生物样品

金属、混凝土、泥沙、纳米材料、生物医药材料

六、样品需要做哪些前处理

非损伤微测技术最大的特点就是活体、无损检测,因此动植物材料在检测前,不需要任何的液氮速冻、染色、研磨处理等。

1、动物单细胞

因NMT是活体检测,故从培养箱中拿出来后,置于培养皿中,直接检测即可

2、动物组织

因NMT是活体检测,无需提前处理。如检测部位天然暴露在外,如斑马鱼皮肤离子细胞、侧线毛细胞,直接检测即可。如检测部位位于体内,需在检测时暴露出检测部位(可采用麻醉的方式),后检测即可。

3、植物根茎叶等组织器官

天然暴露在外的组织器官,例如根、茎、叶的表面,无需任何处理,直接检测即可。水培、土培、砂培、平板培养均可。

4、植物原生质体/液泡

因NMT是基于微传感器/探针的非损伤检测,检测时不接触样品,故原生质体、液泡需要从组织或者细胞中,提取出来后检测。

5、植物叶片的表皮细胞、叶肉细胞、盐腺细胞、保卫细胞

无需提前处理。因这些细胞处于组织内部,故检测时采用撕取等方式,暴露出相应细胞即可。

6、植物花粉管

离体萌发:在培养皿中萌发一段时间后即可直接检测;在体萌发:将柱头置于培养皿中,待萌发一段时间后即可直接检测。

7、植物果实

无需提前处理。如待测部位位于果实内部,需在检测前暴露出相应部门即可。

8、植物悬浮细胞

无需提前处理。检测时,置于培养皿中检测即可。

七、有哪些检测方式?

1、实时处理 /瞬时处理后检测

即瞬时处理,是指在检测过程中,在正常测试液中瞬间加入所需的干旱胁迫溶液(PEG或甘露醇等溶液)的处理方法,目的是为了观察瞬间干旱胁迫下,样品短时间内的离子/分子的变化趋势,即短时效应。

2、预处理/提前处理好后检测

是指在干旱胁迫一段较长的时间后(数十分钟/数小时/数天),观察植物离子/分子进出的情况,即长时效应。

八、检测环境是空气还是溶液

检测时,只要求待测部位浸于溶液中(无需整体都浸在溶液里)。

九、样品是如何检测的

十、可以送样检测吗

可以送样检测。目前非损伤微测技术测试服务由中关村NMT产业联盟统筹管理,由遍布全国的22家NMT创新平台服务中心,提供检测服务。点击获取测试服务

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十一、哪里能获取非损伤微测系统操作培训服务

请直接联系旭月公司获取设备操作培训服务。点击此处查看培训服务介绍

联系人:巨肖宇

电话:010-8262 2628按3

十二、如何购买实验耗材(自行检测)